PCR实验室中的气溶胶污染,检验人该如何正确防护?
一、什么是气溶胶?
气溶胶是指悬浮在气体中的固态或液态颗粒,直径一般小于0.1毫米。
气溶胶的来源和种类有很多,例如空气中的尘埃、影响视野范围的雾霾、燃料未完全燃烧形成的烟、金属加工过程形成的固体粉尘、感冒患者打喷嚏的飞沫等等,都属于气溶胶。
二、随处可见的气溶胶对我们有什么危害?
具体取决于气溶胶的性质、人体暴露的时间和人体免疫力。对于大气气溶胶和环境污染气溶胶,只要不是长时间暴露,一般不会对人体造成很大危害;但对于包含有病原微生物的气溶胶,体质较差的人哪怕只吸入一点也可能致病。举一个简单的例子,新型冠状病毒最主要的传播途径就是呼吸道飞沫和接触传播,在封闭空间内,通过飞沫等气溶胶途径感染新冠的风险是相当高的。
气溶胶不仅对个体健康带来危害,对开展核酸检测实验的PCR实验室来说,更是不容忽视的一大威胁。
三、PCR实验室为什么会存在气溶胶污染?有什么危害?
PCR实验室中的气溶胶污染来源于两个过程:样本制备过程和PCR扩增过程。
在样本制备过程中,样本液体面与空气摩擦就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管、开盖时、吸样时及加样器的反复吸样都可能形成气溶胶而污染;PCR扩增过程可以引起实验室中扩增产物的累积,通常一次典型的PCR扩增可以产生109拷贝的靶序列,如果气溶胶化,甚至最小的气溶胶都会含有106拷贝的扩增产物。
如果不加以控制,在短期内累积的气溶胶化扩增产物就会污染实验室中的试剂、仪器设备和通风系统,造成严重的实验室污染,导致检验样本出现假阳性结果,使临床做出错误的判断和决策,进而引发后续一系列的医疗事故和恐慌。
四、如何防止PCR实验室气溶胶污染?
现实生活中,我们可以通过开窗通风、佩戴口罩等防护用品来降低气溶胶传播风险。类似地,目前PCR实验室主要通过以下措施来防范和控制实验室污染:
(1)建设独立的PCR专用实验室,按试剂准备区、样本制备区、扩增及产物分析区进行严格分区,把低污染风险操作和高污染风险操作在空间上隔离开来。
(2)打造专门的负压通风系统,控制实验室空气从低风险区向高风险区单向流动,避免保存试剂被一次性全部污染。
(3)制定严格的实验室管理条例,控制人员物品单向流动,要求操作人员全程严格进行360度无死角全身防护。
(4)抬高实验人员门槛,需要经过上级单位规范培训、考核并获得“PCR上岗证”的人员方能上岗工作。
(5)PCR反应液分装保存,减少重复加样次数,降低试剂被污染风险。
(6)在PCR试验中加入内标、阴阳性对照等质控,监测检测结果,避免出现假阴性或假阳性。
(7)实验室温度控制在18~27℃,湿度控制在30%~70%。
(8)定期使用75%乙醇、含氯消毒剂和核酸去除剂及紫外线照射进行消毒等。
供稿人:田源源